Abstract:
Amaç: Bu çalışmada, RPS26P25 pseudogeninin meme kanseri hücre hatlarında
ekspresyonunun değerlendirilmesi, gen susturulmasının hücre canlılığı, apoptoz ve sisplatin
duyarlılığı üzerindeki etkilerinin araştırılması amaçlanmıştır.
Gereç ve Yöntem: Analitik tasarımdaki bu araştırma, laboratuvar ortamında in vitro olarak
yürütülmüştür. RPS26P25 ekspresyon analizi için MCF‑7, MDA‑MB‑231 ve sağlıklı hücre
hattı
MCF10A kullanılmıştır. Hücre konsantrasyonu optimizasyonu MTT testi ile
gerçekleştirilmiş, her iki meme kanseri hücre hattı için optimal yoğunluk 250×10³ hücre/ml
olarak belirlenmiştir. qRT‑PCR ile gen ifadesi ölçülmüş, gen susturulması için siRNA
uygulanmıştır. Sitotoksisite ve IC₅₀ değerleri MTT testiyle hesaplanmış, sisplatin
uygulamasından sonra apoptoz ve hücre döngüsü analizleri akım sitometrisi ile yapılmıştır.
Deneyler üç tekrarlı olarak gerçekleştirilmiş, istatistiksel değerlendirmelerde Student T-testi ve
One-way ANOVA uygulanmıştır.
Bulgular: RPS26P25 geninin ekspresyonu MCF‑7’de MCF10A’ya göre 14,95 kat,
MDA‑MB‑231'de 5,74 kat artış göstermiştir. Gen susturulması, her iki tümör hücre hattında
hücre canlılığını azaltmış ve apoptozu artırmıştır. Sisplatine karşı bulunan IC₅₀ değerleri MCF‑7
için 2,46 µM, MDA‑MB‑231 için 49,56 µM olarak hesaplanmıştır. Ek olarak, gen susturulması
sisplatin etkisiyle kombine edildiğinde, her iki hücre hattında erken ve geç apoptoz oranlarında
artış belirlenmiştir.
Sonuç: RPS26P25 pseudogeninin meme kanseri hücrelerinde artmış şekilde ifade edildiği ve
gen susturulmasının hücre canlılığını azaltıp apoptozu artırarak sisplatine duyarlılığı yükselttiği
bulunmuştur. Bu sonuçlar, RPS26P25’in hedeflenmesinin potansiyel bir terapötik strateji
olabileceğini düşündürmektedir.
