PKR Kinaz Aktivasyonunun Koryokarsinom Hücrelerinde Kemoterapötik Ajana Duyarlılığına Etkisi

DSpace Ana Sayfası
→
Tez
→
Yüksek Lisans
→
Öğe Göster

dc.contributor.advisor	Yalçın, Abdullah
dc.contributor.author	Bilen, Büşra
dc.date.accessioned	2023-09-01T06:45:09Z
dc.date.available	2023-09-01T06:45:09Z
dc.date.issued	2023
dc.date.submitted	2023-08-07
dc.identifier.uri	http://hdl.handle.net/11607/5060
dc.description.abstract	Amaç: Hücre kültüründe çoğaltılan koryokarsinom hücrelerinin PKR aktivasyonu sonucunda proliferasyon, apoptotik özelliklerinin ne şekilde değişeceğini belirmeyi, PKR aktivasyonunun koryokarsinom hücrelerinde kemoterapötik ajan doksorubisine karşı duyarlılığını belirleyerek, kanser tedavisinde kullanabilecek bir alternatif olabileceğini göstermeyi hedeflendi. Gereç ve Yöntem: Hücre kültürü yöntemiyle koryokarsinom hücreleri çoğatıldı. Hücreler, doksorubisin grubu ve poly I:C/LPS/doksorubisin grubu olarak iki gruba ayrıldı. Doksorubisin farklı dozlarda hücrelere uygulandı. PKR aktivasyonu oluşturmak için ise LPS ve poly I:C hücrelere uygulandı. Ardından gruplar; kontrol, doksorubisin, poly I:C/LPS ve poly I:C/LPS/doksorubisin olarak oluşturuldu ve swan 71 hücreleri üzerine olan etkilerine belirlemek için MTT canlılık testi yapıldı. Flow sitometri yöntemiyle canlılığa, nekroz ve apoptoz yolaklarına bakıldı. Protein izolasyonu metoduyla protein elde edildi. Ardından, bradford deneyi ile elde edilen protein miktarı belirlendi. PKR aktivasyonun tespiti ve PKR aktivasyonunda doksorubisinin etkisini belirlemek için western blot deneyi yapılarak p-PKR bakıldı. Bulgular: Hücre sayım cihazıyla yapılan deneyde doksorubisinin farklı dozları ile muamele edilen swan 71 hücrelerinde ve PKR aktive edilmiş hücrelerde doksorubisinle birlikte kontrole oranla doza ve zamana bağlı canlılık yüzdesinde konsantrasyon arttıkça istatistiksel olarak anlamlı azalmalar gözlendi. Devamında MTT testi deney grupları değerlendirildi fakat sonuç elde edilemedi. Flow sitometride bu gruplarda canlılık değerlerine bakıldığında ise poly I:C/LPS/dox grubunda ise doksorubisin grubuna göre istatistiksel olarak anlamlı bir artış saptandı. Nekroz yolağında ise, LPS/polyI:C/dox grubunun ise doksorubisin grubun göre nekroz yolağına gittiği görüldü. Apoptoz yolağında, LPS/polyI:C/dox grubunun doksorubisin grubuna göre apoptoza gittiği gözlendi. Son olarak tüm gruplarda p-PKR aktivasyonu western blot analiziyle tespit edildi. PKR aktivasyonunun doksorubisinin duyarlılığını engellediği görüldü. Sonuç:PKR aktivasyonunun koryokarsinom hücrelerinde bir kemoterapötik ajan olan doksorubisine karşı direnç gösterdiği gözlendi.	tr_TR
dc.description.tableofcontents	İÇİNDEKİLER KABUL VE ONAY İ TEŞEKKÜR İİ SİMGELER VE KISALTMALAR DİZİNİ V ŞEKİLLER DİZİNİ Vİ RESİMLER DİZİNİ Vİİİ TABLOLAR DİZİNİ İX ÖZET X ABSTRACT Xİİ 1. GİRİŞ 1 2. GENEL BİLGİLER 3 2.1. Kanser 3 2.2. Gestasyonel Trofoblastik Hastalıklar 3 2.2.1. Gestasyonel Trofoblastik Hastalıklarda Epidemiyoloji 4 2.2.2. Gestasyonel Trofoblastik Hastalıkların Genetik Özellikleri 5 2.2.3.Gestasyonel Trofoblastik Hastalıkların Tanı ve Tedavisi 5 2.3 Kemoterapi İlacı Doksorubisin 6 2.4. Koryokarsinom 6 2.5. PKR 7 2.5.1. PKR Tanımı ve Yapısı 7 2.5.2. PKR Aktivasyonu 8 2.6. Apoptoz 8 3. GEREÇ VE YÖNTEM 10 3.1. Gereç 10 3.1.1. Cihazlar 10 3.1.2. Kullanılan Kimyasal Maddeler 11 3.2. Yöntem 13 3.2.1. Hücre Kültürü 13 3.2.1.1. Çalışmada Kullanılan Hücreler 13 3.2.1.2. Kullanılan Kemoterapik Doksorubisin İlacının Hazırlanması 13 3.2.1.3. Hücre Hattının Stoktan Çıkarılması 13 3.2.1.4. Hücre Hattının Pasajlanması 14 3.2.1.5. Hücre Hattının Stoklanması 14 3.2.1.6. Kullanılan Mediumun Hazırlanması 14 3.2.2. Çalışmada Kullanılacak Hücre Gruplarının Belirlenmesi 15 3.2.3. Hücre Sayım Cihazı ile Hücrelerin Canlı ve Ölü Oranlarının Belirlenmesi 15 3.2.4. Metiltiazotetrazolium (MTT) Canlılık Testi 16 3.2.5. Flow Sitometri Metodu 18 3.2.6. Protein İzalasyonu 19 3.2.7. Protein Tayini Metodu 20 3.2.8. Western Blot Metodu 21 3.2.9. İstatiksel Analizler 22 4. BULGULAR 23 4.1. Hücre Sayım Cihazı ile Canlı ve Ölü Hücre Sayım Oranı Bulguları 23 4.2. MTT (Metiltiazotetrazolium) Canlılık Metodu Bulguları 32 4.3. Flow Sitometri Metodu Bulguları 39 4.4. Western Blot Deneyi Bulguları 52 5. TARTIŞMA 54 6. SONUÇ VE ÖNERİLER 57 KAYNAKLAR 59 BİLİMSEL ETİK BEYANI 63 ÖZ GEÇMİŞ 64	tr_TR
dc.language.iso	tur	tr_TR
dc.publisher	Aydın Adnan Menderes Üniversitesi, Sağlık Bilimleri Enstitüsü	tr_TR
dc.rights	info:eu-repo/semantics/embargoedAccess	tr_TR
dc.subject	Doksorubisin, Koryokarsinom, PKR Aktivasyonu.	tr_TR
dc.title	PKR Kinaz Aktivasyonunun Koryokarsinom Hücrelerinde Kemoterapötik Ajana Duyarlılığına Etkisi	tr_TR
dc.type	masterThesis	tr_TR
dc.contributor.authorID	10570624	tr_TR
dc.contributor.department	Tıbbi Biyoloji Anabilim Dalı	tr_TR