dc.contributor.advisor |
Yalçın, Abdullah |
|
dc.contributor.author |
Bayrak, Elif |
|
dc.date.accessioned |
2023-01-19T10:42:58Z |
|
dc.date.available |
2023-01-19T10:42:58Z |
|
dc.date.issued |
2023 |
|
dc.date.submitted |
2023-12-26 |
|
dc.identifier.uri |
http://hdl.handle.net/11607/4912 |
|
dc.description.abstract |
Amaç: Bu çalışmanın amacı GDM’li kadınlardan alınan plasenta örneklerinde inflamasyon
ve insülin direnci ile ilişkili biyomarkörlerin hamilelik öncesi diyabet tanısı almış hamile
kadınlardan alınan plasenta örneklerindeki seviyesinin kıyaslanmasıdır.
Gereç ve Yöntem: Çalışma, etik kurul onayı alındıktan sonra Aydın Adnan Menderes
Üniversitesi Eğitim ve Araştırma Hastanesi'ne gelen hamile kadınlardan alınan plasenta
doku örnekleri ile gerçekleştirildi. Gestasyonel diyabetli kadınlardan (GDM grubu)(n:10),
glukoz intoleransı olmayan gebelerden (kontrol grubu) (n:12) ve hamilelik öncesi diyabet
tanısı almış kadınlardan (Pre-DM grubu)(n:10) plasenta örnekleriyle 3 grup belirlendi.
Plasenta dokularında inflamasyon düzeyini belirlemek için IL-1β, IL-6, TNF-α sitokinleri ve
NF-kB sinyal yolu q-PCR ve ELISA analizleri kullanılarak analiz edildi. ELISA analizinde,
kullanılan standartlar (IL-1β, IL-6, TNF-α ve NF-kB) ile trofoblast hücrelerinde (Swan71)
inflamasyon ortamı oluşturuldu. LPS+Pol I:C ve kontrol grubu da dahil olmak üzere 6 gruba
insülin verilerek insülin sinyal yolu indüklendi. Daha sonra insülin sinyal yolağında önemli
rol oynayan IRS-1, Akt, p-Akt ve p-IRS-1 protein ekspresyon seviyelerine bakıldı.
Ardından her grupta sinyalin ne kadar aktive olduğu Western blot ile analiz edildi. Veriler
tek yönlü ANOVA testi kullanılarak değerlendirildi.
Bulgu: Çalışmadaki veri sonuçlarına göre plasenta dokularında mRNA düzeyinde IL-1β,
IL-6, TNF-α ve NF-κB seviyeleri kıyaslandığında kontrol, GDM ve Pre-DM gruplarının
hiçbirinde anlamlı bir fark gözlemlenmemiştir. Ancak bu durum ELISA analizi ile
incelendiğinde IL-1β, IL-6, TNF-α ve NF-κB seviyeleri gruplar arasında farklı düzeyde
olduğu tespit edilmiştir. IL-1β seviyesi, GDM grubunda ve Pre-DM grubunda kontrol gruba
17
göre; IL-6 ve TNF-α seviyesi, GDM grubunun diğer iki gruba göre; NF-κB seviyesi GDM
grubu kontrole göre ve Pre-DM grubuna göre anlamlı bir şekilde artış gösterdiği sonucu
elde edildi. İnflamasyon ortamı oluşturulan trofoblast hücrelerinde Akt fosforillenmesi
TNF-α grubunda daha fazla görüldü. IRS-1 fosforillenmesi ise kontrole kıyasla en fazla
TNF-α ve NF-κB grubunda elde edildi.
Sonuç: Plasenta dokusunda GDM inflamasyonunun, Pre-DM grubuna göre görece arttığı
gözlemlendi. Bu artış mRNA düzeyinde görülmedi ancak protein seviyesinde kontrol ve
Pre-DM grubuna göre arttı. Bu durum inflamasyona neden olan etkenin maternal
dokulardan gelen sitokinler olduğunu düşündürmektedir. Diyabette insülin direncinin neden
olduğu inflamasyonun sonucunda salgılanan sitokinlerin, maternal dokudan plasentaya
geçerek buradaki sitokin seviyesinde artışa neden olduğu sonucuna ulaşılabilir.
Anahtar kelimeler: Diyabet, Gestasyonel Diyabet, İnflamasyon, İnsülin Direnci, Plasenta. |
tr_TR |
dc.description.tableofcontents |
İÇİNDEKİLER
KABUL VE ONAY i
TEŞEKKÜR ii
İÇİNDEKİLER iii
SİMGELER VE KISALTMALAR DİZİNİ vi
ŞEKİLLER DİZİNİ viii
TABLOLAR DİZİNİ x
RESİMLER DİZİNİ xii
ÖZET xiii
ABSTRACT xv
1. GİRİŞ 1
2. GENEL BİLGİLER 3
2.1. Diyabetes Mellitus 3
2.1.1. Diabetes Mellitus Tipleri 3
2.1.2. Karbonhidrat Metabolizması 4
2.1.3. Diabetes Mellitusun Komplikasyonları 5
2.1.4. İnsülinin Fizyolojik Rolü-İnsülin Direnci 7
2.1.4.1. Protein Kinaz B (PKB/AKT) 8
2.1.4.2. İnsülin Reseptör Substratı 1 (IRS-1) 9
2.1.5. İnflamasyon 11
2.1.5.1. Tümör Nekroz Faktör-Alfa (TNF-α) 12
2.1.5.2. İnterlökin-1 Beta (IL-1β) 13
2.1.5.3. İnterlökin-6 (IL-6) 13
2.1.5.4. Nükleer Faktör Kappa-B Yolağı (NF-κB) 14
2.2. Hamilelikte Maternal Metabolik Değişimler 15
2.2.1. Hamilelikte Diyabet : Gestasyonel Diabetes Mellitus (GDM) 16
2.3. Plasenta 20
2.3.1. Plasentanın Fizyolojik Yapısı 20
2.3.2. Gestasyonel Diabetes Mellitusta Plasenta 21
2.4. Hamilelik İmmünolojisi 22
2.4.1. Gestasyonel Diabetes Mellitus’ta İnflamasyon 23
2.5. Hamilelik Hormonları ve GDM 24
2.5.1 Maternal Hormonlar 24
2.5.2. Plasental Hormonlar 25
3. GEREÇ VE YÖNTEM 27
3.1. Gereç 27
3.1.1. Cihazlar 27
3.1.2. Biyolojik Materyal 27
3.1.3. Kimyasal Maddeler, Kitler, Enzimler, Reaktifler ve Laboratuvar Malzemeleri 28
3.1.4. Tamponlar 29
3.1.5 Antikorler 29
3.1.6. Primerler 30
3.2. Yöntem 30
3.2.1. Hasta Seçimi ve Plasenta Dokularının Hazırlanması 30
3.2.1.1. Hücre Hatlarının Pasajlanması 31
3.2.1.2. Hücrelerin Dondurulması 31
3.2.1.3. Hücrelerin Çözülmesi 32
3.2.1.4. SWAN71 Hücrelerinin Sitokinlerle Muamelesi 32
3.2.2. Hücrelerden Protein İzolasyonu 32
3.2.3. Proteinlerin Kantitatif Analizi 33
3.2.4. Western Blot Analizi 34
3.2.5. RNA İzolasyonu 34
3.2.6. cDNA Sentezi 35
3.2.7. Gerçek Zamanlı-Polimeraz Zincir Reaksiyonu (q-PCR) 36
3.2.8. ELISA Analizi 37
3.2.9. İstatiksel Analiz 40
4. BULGULAR 42
4.1. Kontrol, GDM ve Pre-DM Gruplarındaki Hamile Kadınların Karakteristik Özellikleri 42
4.2. Plasental Dokularındaki İnflamasyonun q-PCR Analizi ile Belirlenmesi 47
4.3. İnflamasyon Ortamı Oluşturularak İnsülin Yolağı İndüklenen Plasenta Hücrelerinde p-AKT ve p-IRS-1 Ekspresyonlarının Belirlenmesi 51
5. TARTIŞMA 53
6. SONUÇ VE ÖNERİLER 56
KAYNAKLAR 58
EKLER 64
EK 1. Etik Kurul Onay Belgesi 64
BİLİMSEL ETİK BEYANI 65
ÖZ GEÇMİŞ 66
|
tr_TR |
dc.language.iso |
tur |
tr_TR |
dc.publisher |
Aydın Adnan Menderes Üniversitesi, Sağlık Bilimler Enstitüsü |
tr_TR |
dc.rights |
info:eu-repo/semantics/embargoedAccess |
tr_TR |
dc.subject |
Diyabet, Gestasyonel Diyabet, İnflamasyon, İnsülin Direnci, Plasenta. |
tr_TR |
dc.title |
Gestasyonel Diyabette Plasenta Dokularında İnsülin Direnci Ve İnflamasyonun Belirlenmesi |
tr_TR |
dc.type |
masterThesis |
tr_TR |
dc.contributor.department |
Aydın Adnan Menderes Üniversitesi, Sağlık Bilimler Enstitüsü, Tıbbi Biyoloji |
tr_TR |