dc.contributor.advisor |
Yalçın, Abdullah |
|
dc.contributor.author |
Karayel, Ramazan |
|
dc.date.accessioned |
2022-08-15T05:36:46Z |
|
dc.date.available |
2022-08-15T05:36:46Z |
|
dc.date.issued |
2022 |
|
dc.date.submitted |
2022-08-12 |
|
dc.identifier.citation |
Karayel, R. (2022). Plasental Trofoblast Hücre Serilerinde PKR Kinaz Aktivasyonun Oksidatif Stres Üzerine Etkisi. (Yayımlanmamış Yüksek Lisans Tezi). Aydın Adnan Menderes Üniversitesi, Sağlık Bilimleri Enstitüsü: Aydın. |
tr_TR |
dc.identifier.uri |
http://hdl.handle.net/11607/4737 |
|
dc.description.abstract |
Amaç: Çalışmada plasenta trofoblast hücrelerine poly(I:C) ve LPS verilerek PKR
aktivasyonunu uyarabilme kapasitelerinin olup olmadığı amaçlanmıştır. Plasenta trofoblast
hücrelerinde gerçekleşen PKR aktivasyonunun oksidatif stres üzerindeki etkilerinin olup
olmadığı ve PKR aktivasyonu ile oksidatif stres arasındaki bağlantının tespitinin yapılması
amaçlanmıştır. PKR aktivasyonundan dolayı meydana gelen ROS değişimlerine uygulanan
antioksidan maddelerin ROS değişimlerini olan etkisinin tespit edilmesi amaçlanmıştır.
Metot: İlk aşamada hücre kültürü yöntemi ile plasental bewo hücre hatları çoğaltıldı.
Çalışmada 6 farklı grupluk petri kabında hücreler oluşturuldu. İlk grup kontrol grubu olarak
ayrıldı. Dördüncü grup, beşinci grup ve altıncı gruba 50 ul/ml poly(I:C) ve 500 ng/ml LPS
verilerek 24 saat inkübasyona bırakıldı. Plasenta trofoblast hücrelerindeki PKR
aktivasyonunun tespiti için western blot tekniği uygulandı. Hücrelerde PKR aktivasyonu
sonucun da gerçekleşen oksidatif stres belirteçleri ELISA yöntemi ile tespit edildi. İkinci
aşamada gruplara antioksidan madde olarak askorbik asit ve glutatyon uygulandı. İkinci
gruba 100 uM askorbik asit verildi. Üçüncü gruba 24 uM glutatyon verildi. Beşinci ve
altıncı gruplara 100 uM askorbik asit ve 24 uM glutatyon verilerek 24 saat inkübasyona
bırakıldı. Antioksidan maddeler verilerek oksidatif stres parametrelerindeki değişimler
ELISA yöntemi ile tespit edildi. Hücrelerdeki ROS’ ta meydana değişimler akış sitometresi
ile ölçüldü.
Bulgular: İlk aşamada hücrelere uygulanan poly(I:C) ve LPS’nin PKR aktivasyonunu
gerçekleştiği western blot analizinde tespit edildi. PKR aktivasyonuna bağlı olarak oksidatif
stres belirteçlerinde anlamlı değişimler meydana geldi. Gruplara uyguladığımız antioksidan maddeler oksidatif stres belirteç değişimlerini etkiledi. PKR aktivasyonu ROS u arttırırken antioksidan maddeler ROS u azalttı.
Sonuç: PKR aktivasyonu oksidatif stresi arttırdı. Uygulanan antioksidan maddeler oksidatif
stresi azaltırken PKR aktivasyonun etkilerini de azalttı. Çalışmada PKR aktivasyonu ile
oksidatif stresin bağlantılı olduğu ve hücrelerdeki oksidatif stresin PKR aktivasyonuyla ile
gerçekleştiğini gösterdi.
Anahtar Kelimeler: PKR Aktivasyonu, Oksidatif Stres, ROS, Askorbik Asit, Glutatyon |
tr_TR |
dc.description.tableofcontents |
KABUL VE ONAY ..................................................................................................................i
TEŞEKKÜR ............................................................................................................................ii
SİMGELER VE KISALTMALAR DİZİNİ ...........................................................................vi
ŞEKİLLER DİZİNİ................................................................................................................ix
TABLOLAR DİZİNİ............................................................................................................... x
ÖZET......................................................................................................................................xi
ABSTRACT .........................................................................................................................xiii
1. GİRİŞ................................................................................................................................... 1
2. GENEL BİLGİLER............................................................................................................. 3
2.1. Diyabet Tanımı ................................................................................................................. 3
2.1.1. Karaciğer Glikoz Metabolizması................................................................................... 3
2.1.2. Hepatositler Aracılığı ile Glikozun Taşınması............................................................... 4
2.1.3. Diyabet sınıflandırılması ............................................................................................... 5
2.1.4. Diyabet Komplikasyonları............................................................................................. 6
2.1.5. Tip 1 Diyabet Tanımı..................................................................................................... 7
2.1.6.1. Tip 1 Diyabet Epidemiyolojisi ................................................................................... 8
2.1.6.2. Tip 1 Diyabet Patofizyolojisi...................................................................................... 9
2.1.7. Tip 2 Diyabet............................................................................................................... 11
2.1.8. İnsülin Direnci ............................................................................................................. 11
2.1.8.1. İnsülin Direnci Moleküler Yollar.............................................................................. 12
2.1.9. Gestasyonel Diyabet Tanımı........................................................................................ 18
2.1.9.1. Gestasyonel Diyabet Epidemiyolojisi ...................................................................... 18
2.1.9.2. Gestasyonel Diyabet Risk Faktörleri........................................................................ 18
iv
2.1.9.3. Gestasyonel Diyabet Patofizyolojisi......................................................................... 18
2.1.9.3.1. Maternal İnsülin Direnci........................................................................................ 19
2.1.9.3.2. İnflamasyon ........................................................................................................... 20
2.1.9.3.3. Plasental ve Endotel Disfonksiyon........................................................................ 21
2.2. Endoplazmik Retikulum................................................................................................. 22
2.2.1. Tanımı.......................................................................................................................... 22
2.2.2. Yapısı ve İşlevi............................................................................................................. 22
2.2.3. Endoplazmik Retikulum Stresi.................................................................................... 24
2.3. Oksidatif Stres................................................................................................................ 27
2.4. Nitrozatif Stres................................................................................................................ 28
2.4. PKR ................................................................................................................................ 28
2.4.1. Tanımı ve Yapısı .......................................................................................................... 28
2.4.2. PKR Aktivasyonu ........................................................................................................ 29
2.4.3. PKR Metabolizma İlişkisi ........................................................................................... 30
2.5. Plasenta........................................................................................................................... 32
2.5.1. Plasenta oluşumu ve morfolojisi ................................................................................. 32
2.5.2. Plasenta ve Oksidatif Stres.......................................................................................... 33
2.5.3. Plasenta ve Nitrozotif Stres ......................................................................................... 34
3. GEREÇ VE YÖNTEM...................................................................................................... 37
3.1. Gereç............................................................................................................................... 37
3.1.1. Cihazlar........................................................................................................................ 37
3.1.2. Kimyasal Maddeler ve Antikorlar ............................................................................... 38
3.2. Yöntem ........................................................................................................................... 40
3.2.1. Hücre Kültürü Hazırlanması........................................................................................ 40
3.2.2. Çalışmada Kullanılacak Hücre Gruplarının Belirlenmesi........................................... 40
3.2.3. Protein İzolasyonu ....................................................................................................... 41
v
3.2.4. Western Blot ................................................................................................................ 41
3.2.5. ELISA Yöntemi ........................................................................................................... 43
3.2.6. ROS Potansiyelinin Tespiti.......................................................................................... 44
3.2.7. İstatiksel Analiz ........................................................................................................... 44
4. BULGULAR ..................................................................................................................... 45
4.1. p-PKR İfadesinin Plasenta Trofoblast Hücrelerinde Protein Düzeyinde Belirlenmesi .. 45
4.2. ELISA Yöntemi ile Trofoblast Hücrelerindeki Enzimlerin Kantitatif Ölçümlerinin
Belirlenmesi ................................................................................................................. 46
4.3. Grupların ROS Potansiyellerinin Karşılaştırılması ........................................................ 48
5. TARTIŞMA ....................................................................................................................... 50
6. SONUÇ VE ÖNERİLER................................................................................................... 52
KAYNAKLAR ...................................................................................................................... 53
BİLİMSEL ETİK BEYANI................................................................................................... 62
ÖZ GEÇMİŞ.......................................................................................................................... 63 |
tr_TR |
dc.language.iso |
tur |
tr_TR |
dc.publisher |
Aydın Adnan Menderes Üniversitesi, Sağlık Bilimleri Enstitüsü |
tr_TR |
dc.rights |
info:eu-repo/semantics/embargoedAccess |
tr_TR |
dc.subject |
PKR Aktivasyonu, Oksidatif Stres, ROS, Askorbik Asit, Glutatyon |
tr_TR |
dc.title |
Plasental Trofoblast Hücre Serilerinde PKR Kinaz Aktivasyonun Oksidatif Stres Üzerine Etkisi |
tr_TR |
dc.title.alternative |
The Effect Of PKR Kinase Activation On Oxidative Stress Response In Placental Trophoblast Cell |
tr_TR |
dc.type |
masterThesis |
tr_TR |
dc.contributor.department |
Aydın Adnan Menderes Üniversitesi, Sağlık Bilimleri Enstitüsü, Tıbbi Biyoloji Anabilim Dalı |
tr_TR |