Özet:
Amaç: Çalışmada plasenta trofoblast hücrelerine poly(I:C) ve LPS verilerek PKR
aktivasyonunu uyarabilme kapasitelerinin olup olmadığı amaçlanmıştır. Plasenta trofoblast
hücrelerinde gerçekleşen PKR aktivasyonunun oksidatif stres üzerindeki etkilerinin olup
olmadığı ve PKR aktivasyonu ile oksidatif stres arasındaki bağlantının tespitinin yapılması
amaçlanmıştır. PKR aktivasyonundan dolayı meydana gelen ROS değişimlerine uygulanan
antioksidan maddelerin ROS değişimlerini olan etkisinin tespit edilmesi amaçlanmıştır.
Metot: İlk aşamada hücre kültürü yöntemi ile plasental bewo hücre hatları çoğaltıldı.
Çalışmada 6 farklı grupluk petri kabında hücreler oluşturuldu. İlk grup kontrol grubu olarak
ayrıldı. Dördüncü grup, beşinci grup ve altıncı gruba 50 ul/ml poly(I:C) ve 500 ng/ml LPS
verilerek 24 saat inkübasyona bırakıldı. Plasenta trofoblast hücrelerindeki PKR
aktivasyonunun tespiti için western blot tekniği uygulandı. Hücrelerde PKR aktivasyonu
sonucun da gerçekleşen oksidatif stres belirteçleri ELISA yöntemi ile tespit edildi. İkinci
aşamada gruplara antioksidan madde olarak askorbik asit ve glutatyon uygulandı. İkinci
gruba 100 uM askorbik asit verildi. Üçüncü gruba 24 uM glutatyon verildi. Beşinci ve
altıncı gruplara 100 uM askorbik asit ve 24 uM glutatyon verilerek 24 saat inkübasyona
bırakıldı. Antioksidan maddeler verilerek oksidatif stres parametrelerindeki değişimler
ELISA yöntemi ile tespit edildi. Hücrelerdeki ROS’ ta meydana değişimler akış sitometresi
ile ölçüldü.
Bulgular: İlk aşamada hücrelere uygulanan poly(I:C) ve LPS’nin PKR aktivasyonunu
gerçekleştiği western blot analizinde tespit edildi. PKR aktivasyonuna bağlı olarak oksidatif
stres belirteçlerinde anlamlı değişimler meydana geldi. Gruplara uyguladığımız antioksidan maddeler oksidatif stres belirteç değişimlerini etkiledi. PKR aktivasyonu ROS u arttırırken antioksidan maddeler ROS u azalttı.
Sonuç: PKR aktivasyonu oksidatif stresi arttırdı. Uygulanan antioksidan maddeler oksidatif
stresi azaltırken PKR aktivasyonun etkilerini de azalttı. Çalışmada PKR aktivasyonu ile
oksidatif stresin bağlantılı olduğu ve hücrelerdeki oksidatif stresin PKR aktivasyonuyla ile
gerçekleştiğini gösterdi.
Anahtar Kelimeler: PKR Aktivasyonu, Oksidatif Stres, ROS, Askorbik Asit, Glutatyon
