Nanolipozomlar içinde enkapsüle edilen incir lateksi ve fisin enziminin ht-29 insan kolon kanser hücre hattında incelenmesi

DSpace Ana Sayfası
→
Tez
→
Yüksek Lisans
→
Öğe Göster

dc.contributor.advisor	Boyacıoğlu, Olcay
dc.contributor.author	Tecimen, Seçil
dc.date.accessioned	2021-11-26T08:31:00Z
dc.date.available	2021-11-26T08:31:00Z
dc.date.issued	2021-11-05
dc.date.submitted	2021-10-30
dc.identifier.citation	Tecimen, S. (2021) Nanolipozomlar içinde enkapsüle edilen incir lateksi ve fisin enziminin ht-29 insan kolon kanser hücre hattında incelenmesi (yayınlanmmaış yüksek lisans tezi) Aydın Adnan Menderes Üniversitesi Fen Bilimleri Enstitüsü, Aydın	tr_TR
dc.identifier.uri	http://hdl.handle.net/11607/4522
dc.description.abstract	Amaç: Bu çalışmanın amacı, nanolipozomlar içerisinde enkapsüle edilen incir lateksi ve fisin enziminin HT-29 insan kolon kanser hücre hattı üzerindeki antiproliferatif etkilerini incelemektir. Materyal ve Yöntem: Araştırma, Sarı Lop ve Aydın Siyahı incir çeşitlerinden elde edilen lateksleri ve ticari olarak satın alınan fisin enzimi ile gerçekleştirilmiştir. İnce film hidrasyon yöntemi ile incir lateksleri ve fisin enzimi nanolipozomlar içerisinde enkapsüle edilmiş ve karakteristik özellikleri belirlenmiştir. Son olarak, hazırlanan lipozomların sitotoksik ve apoptik etkileri HT-29 insan kolon kanseri hücre hattı üzerinde incelenmiştir. Bulgular: Boyut analizleri sonucunda istenilen boyut aralıklarında ve zeta potansiyel değerlerinde nanolipozomlar elde edilememiştir. Polidispersite indeksi literatürde belirtilen değerlere uygun olarak bulunmuştur. Fisin enzimi ve incir lateksleri HT-29 hücre hattı üzerinde sitotoksik etki göstermiştir. Lipozomal fisin ve incir latekslerinde yüksek oranda azatılmış sitotoksik etki görülmüştür. Fisin enzimi ve incir latekslerinde, kontrol grubu olarak kullanılan besiyeri ile kıyaslandığında artan apoptoz seviyesi gözlemlenmiştir. Lipozomal fisin ve incir latekslerinde ise apoptoz seviyelerinde önemli değişiklikler tespit edilmemiştir. Sonuç: Lipozomal enkapsülasyonun hem fisin enzimi hem de incir latekslerinde toksik etkiyi yüksek oranda maskelediği tespit edilmiştir. Sağlık alanında yapılacak çalışmalarda incir lateksi, fisin enzimi ve lipozomal formülasyonlarının uygun adaylar olabileceği gözlemlenmiştir.	tr_TR
dc.description.abstract	Objective: The aim of this study is to examine the antiproliferative effects of fig latex and ficin enzyme encapsulated in nanoliposomes on HT-29 human colon cancer cell line. Material and Methods: The research was carried out with latex obtained from Sarı Lop and Aydın Siyahı fig cultivars and commercially purchased fisin enzyme. Fig latex and ficin enyzme were encapsulated in nanoliposomes by thin-film hydration method and their characteristics were determined. Finally, the cytotoxic and apoptic effects of the prepared liposomes were investigated on the HT-29 human colon cancer cell line. Results: As a result of the size analysis, nanoliposomes could not be obtained in the desired size ranges and zeta potential values. Polydispersity index was found in accordance with the values stated in the literature. Fisin enzyme and fig latex showed cytotoxic effect on HT-29 cell line. A highly reduced cytotoxic effect was observed in liposomal fisin and fig latex. An increased level of apoptosis was observed in fisin enzyme and fig latex compared to the medium used as the control group. Significant changes in apoptosis levels were not detected in liposomal ficin and fig latex. Conclusion: It was determined that liposomal encapsulation highly masked the toxic effect in both ficin enzyme and fig latex. It has been observed that fig latex, ficin enzyme and liposomal formulations may be suitable candidates in studies in the field of health.	tr_TR
dc.description.tableofcontents	İÇİNDEKİLER KABUL VE ONAY ...................................................................................................................ii TEŞEKKÜR ..............................................................................................................................iii SİMGELER VE KISALTMALAR DİZİNİ............................................................................viii ŞEKİLLER DİZİNİ....................................................................................................................x ÇİZELGELER DİZİNİ.............................................................................................................xii ÖZET.......................................................................................................................................xiv ABSTRACT .............................................................................................................................xv 1.GİRİŞ.......................................................................................................................................1 2. KAYNAK ÖZETLERİ...........................................................................................................3 2.1. İncir (Ficus carica L.)......................................................................................................3 2.1.1 İncir Çeşitleri..............................................................................................................4 2.1.1.1 Sarı Lop ...............................................................................................................4 2.1.1.2 Aydın Siyahı (Bursa Siyahı)................................................................................5 2.1.2 İncir Lateksi (İncir Sütü)............................................................................................5 2.1.3 Fisin Enzimi ...............................................................................................................6 2.2. Nanoteknoloji ve Nanoenkapsülasyon.............................................................................6 2.2.1. Nanolipozomlar.........................................................................................................7 2.2.2. Nanolipozomların Oluşum Mekanizmaları...............................................................8 2.2.3. Nanolipozom Hazırlama Yöntemleri ........................................................................8 2.2.4. Nanolipozomların Hazırlanmasında Kullanılan Malzemeler....................................9 2.2.4.1. Fosfolipitler ........................................................................................................9 2.2.4.2. Kolesterol ...........................................................................................................9 2.2.5. Nanolipozomların Karakterizasyonu ......................................................................10 2.2.5.1. Boyut ................................................................................................................10 v 2.2.5.2. Zeta Potansiyeli ................................................................................................10 2.2.5.3. Enkapsülasyon Verimi......................................................................................10 2.3. Kanser ............................................................................................................................11 2.3.1 Kolon Kanseri ..........................................................................................................12 2.3.2. HT-29 Kolon Kanser Hücre Hattı...........................................................................13 2.4. Hücre Kültürü ................................................................................................................13 2.4.1. Hücre Kültürü Bileşenleri .......................................................................................14 2.4.1.1. Hücre Kültürü Besiyeri.....................................................................................14 2.4.1.2. Serum................................................................................................................14 2.4.1.3. Substrat.............................................................................................................15 2.4.1.4. Fiziki Ortam......................................................................................................15 2.4.2. In Vitro Sitotoksisite Testleri..................................................................................15 2.4.2.1. Mtt Yöntemi .....................................................................................................15 2.4.2.2. ATP Biyolüminesans Testi...............................................................................16 2.4.3. Hücre Ölüm Mekanizmaları....................................................................................16 2.4.3.1. Apoptoz ............................................................................................................17 2.4.3.2. Nekroz ..............................................................................................................17 2.4.3.3. Otofaji ile İlişkili Hücre Ölümü .......................................................................17 3. MATERYAL VE YÖNTEM ...............................................................................................18 3.1. Materyal .........................................................................................................................18 3.1.1 Kullanılan Kimyasal Maddeler ................................................................................18 3.1.2.Kullanılan Cihazlar ..................................................................................................19 3.2. Yöntem...........................................................................................................................20 3.2.1. İncir Lateksi Toplanması ve Liyofilizasyonu .........................................................20 3.2.2. Lipozom Yapımı .....................................................................................................21 3.2.3. Lipozom Karakterizasyonu .....................................................................................21 3.2.3.1. Lipozomal Fisin Enzimi ve İncir Latekslerinin Boyut Analizi ........................21 vi 3.2.3.2. İncir Lateksleri ve Fisin Enziminin Peroksidaz Benzeri Aktivitesi .................21 3.2.3.3. Lipozomal İncir Lateksleri ve Fisinin Konsantrasyonu ve Enkapsülasyon Verimi .......................................................................................................................................22 3.2.4 Hücre Kültürü...........................................................................................................23 3.2.4.1 Hücre Pasajlama İşlemi .....................................................................................23 3.2.4.2 Fisin ve İncir Latekslerinin MTT ile Sitotoksisite Analizi................................23 3.2.4.3 Lipozomal Fisin ve İncir Latekslerinin Lüminesans Yöntem ile Sitotoksisite Analizi ...........................................................................................................................24 3.2.4.4. Lipozomal Fisin ve İncir Latekslerinin Apoptotik Etkisinin Analizi...............25 3.2.5. İstatistik Analiz…………………..……………………………………………………..25 4. BULGULAR ........................................................................................................................26 4.1. İncir Lateksleri ve Fisin Enziminin Peroksidaz Benzeri Aktivitesinin Belirlenmesi ....26 4.1.1. Fisin Enziminin Farklı Konsantrasyonlarda Peroksidaz Benzeri Aktivitesi..........26 4.1.2. Fisin Enziminin Farklı İnkübasyon Sürelerinde Peroksidaz Benzeri Aktivitesi.....27 4.1.3. Fisin Enziminin Farklı Sıcaklık Değerlerinde Peroksidaz Benzeri Aktivitesi........29 4.1.4. PBS ile Hazırlanan Fisin Enziminin Farklı Konsantrasyonlarda Peroksidaz Benzeri Aktivitesi...........................................................................................................................31 4.1.5. İncir Latekslerinin Farklı Konsantrasyonlarda Peroksidaz Benzeri Aktivitesi.......34 4.1.6. PBS ile Hazırlanan İncir Latekslerinin Farklı Konsantrasyonlarda Peroksidaz Benzeri Aktivitesi..............................................................................................................37 4.2. Lipozomal İncir Lateksleri ve Fisin Enziminin Karakterizasyonu ................................40 4.2.1. Lipozomal İncir Lateksleri ve Fisinin Konsantrasyonu ve Enkapsülasyon Verimi 40 4.2.2. Lipozomal Fisin Enzimi ve İncir Latekslerinin Boyut Analizi...............................43 4.3. Fisin ve İncir Latekslerinin MTT ile Sitotoksisite Analizi ............................................48 4.4. Lipozomal Fisin ve İncir Latekslerinin Lüminesans Yöntem Sitotoksisite Analizi......51 4.5. Lipozomal Fisin ve İncir Latekslerinin Apoptotik Etkisinin Analizi ............................55 5. TARTIŞMA..........................................................................................................................59 5.1. İncir Lateksleri ve Fisin Enziminin Peroksidaz Benzeri Aktivitesinin Belirlenmesi ....59 vii 5.2. Lipozom Yapımı............................................................................................................60 5.3. Lipozomal İncir Lateksleri ve Fisin Enziminin Karakterizasyonu ................................61 5.3.1. Lipozomal İncir Lateksleri ve Fisinin Konsantrasyonu ve Enkapsülasyon Verimi 61 5.3.2. Lipozomal Fisin Enzimi ve İncir Latekslerinin Boyut Analizi...............................62 5.4. Fisin ve İncir Latekslerinin MTT ile Sitotoksisite Analizi ............................................63 5.5. Lipozomal Fisin ve İncir Latekslerinin Lüminesans Yöntem Sitotoksisite Analizi......64 5.6. Lipozomal Fisin ve İncir Latekslerinin Apoptotik Etkisinin Analizi ............................65 6. SONUÇ VE ÖNERİLER .....................................................................................................66 7. KAYNAKLAR.....................................................................................................................67 BİLİMSEL ETİK BEYANI .....................................................................................................76 ÖZ GEÇMİŞ.............................................................................................................................77	tr_TR
dc.language.iso	tur	tr_TR
dc.publisher	Aydın Adnan Menderes Üniversitesi Fen Bilimleri Enstitüsü	tr_TR
dc.rights	info:eu-repo/semantics/openAccess	tr_TR
dc.subject	Encapsulation, Ficin, Fig Latex, Liposome, Cytotoxicity	tr_TR
dc.subject	Enkapsülasyon, Fisin, İncir Lateksi, Lipozom, Sitotoksisite	tr_TR
dc.title	Nanolipozomlar içinde enkapsüle edilen incir lateksi ve fisin enziminin ht-29 insan kolon kanser hücre hattında incelenmesi	tr_TR
dc.title.alternative	İnvestigation of fig latex and ficin enzyme encapsulated in nanoliposomes on ht-29 human colon cancer cell line	tr_TR
dc.type	masterThesis	tr_TR
dc.contributor.department	Aydın Adnan Menderes Üniversitesi Fen Bilimleri Enstitüsü Gıda Mühendisliği Ana Bilim Dalı	tr_TR