UVB IŞIĞINA MARUZ KALAN EPİDERMAL HÜCRELERDE İNSAN ADİPOZ DOKU MEZENKİMAL  KÖK HÜCRELERİNİN  ONARICI VE CANLANDIRICI ETKİLERİNİN ARAŞTIRILMASI

DSpace Ana Sayfası
→
Tez
→
Doktora
→
Öğe Göster

dc.contributor.advisor	Yenisey, Çiğdem
dc.contributor.author	Tin Arslan, Yasemin
dc.date.accessioned	2019-05-27T11:54:15Z
dc.date.available	2019-05-27T11:54:15Z
dc.date.issued	2019
dc.date.submitted	2019-04-10
dc.identifier.uri	http://hdl.handle.net/11607/3549
dc.description.abstract	ÖZET UVB IŞIĞINA MARUZ KALAN EPİDERMAL HÜCRELERDE İNSAN ADİPOZ DOKU MEZENKİMAL KÖK HÜCRELERİNİN ONARICI VE CANLANDIRICI ETKİLERİNİN ARAŞTIRILMASI Yasemin TİN ARSLAN, UVB Işığına Maruz Kalan Epidermal Hücrelerde İnsan Adipoz Doku Mezenkimal Kök Hücrelerinin Onarıcı ve Canlandırıcı Etkilerinin Araştırılması, 2019, Adnan Menderes Üniversitesi Tıp Fakültesi Tıbbi Biyokimya AD, Aydın, TÜRKİYE Epidermal hücreler, ciltte oluşan yaraların iyileşmesi için önemli bir rejeneratif kaynaktır. UVB (Ultraviyole B) ışığına maruz kalarak yaşlanma etkisi oluşturulan epidermal hücrelerin kendilerini yenileme ve cilt hasarını onarmadaki yetenekleri azalmıştır. UV radyasyonu özellikle UVB, insan epidermal hücrelerin canlılığını baskılayarak cildin foton yoluyla yaşlanmasına neden olurlar. Adipoz doku mezenkimal kök hücre ortam medyumunun rejeneratif özelliklere sahip olduğu düşünülmektedir. Bu çalışmada amaç, insan adipoz doku mezenkimal kök hücrelerin UVB ışığına maruz kalan insan keratinositlerinde (HaCaT cell lines) onarıcı ve canlandırıcı etkilerin araştırılmasıdır. Ayrıca, kök hücrelerin canlandırıcı etkilerini araştırmak amacıyla Mcl-1 ve p-ERK 1/2 proteinleri ELISA yöntemiyle saptanmıştır. Böylece, sayısal veriler kullanılarak yapılan istatiksel değerlendirme sonucunda daha kantitatif sonuçlara ulaşmak hedeflenmiştir. Epidermal hücrteler dört kez pasajlandı ve UVB ışınına maruz bırakıldı. Işın almayan hücreler ise kontrol grubu olarak kullanıldı. Hücreler farklı konsantrasyonlarda ADMSC (adipoz doku mezenkimal kök hücre ortam medyumu) ile tedavi edildi. UVB (-) hücreler ile kıyaslandığında UVB (+) hücrelerde proliferasyon hızı önemli ölçüde azaldı (p<0.05). ADMSC ortam medyumunun uygulanmasıyla hücre canlılığının arttığı ve %100’lük ADMSC ortam medyumunda en yüksek değere ulaştığı saptandı. ADMSC ortam medyumunun migrasyonu artırdığı belirlendi. Apoptoz analizinde ADMSC ortam medyumu ile apoptozun arttığı saptandı. UVB (+) HaCaT hücrelerinde, Mcl-1 ve p-ERK 1/2 proteinlerinin düzeyleri azalmış ancak ADMSC ortam medyumunun uygulanması ile birlikte doza bağlı artışlar görülmüştür. Her iki protein düzeyi de %100’lük konsantrasyonda en yüksek değerine ulaşmıştır. ADMSC ortam medyumu içindeki faktörlerin, özellikle UVB (+) keratinositlerin prolifeasyonunu desteklediği, rejeneratif ve reperatif etkilere sahip olduğu saptanmıştır.	tr_TR
dc.description.tableofcontents	İÇİNDEKİLER KABUL ONAY ………..………………………………………………………………..….…i TEŞEKKÜR………………………………………………..……………….……………..…..ii İÇİNDEKİLER………………………………………….………………………………..…..iii SİMGELER VE KISALTMALAR DİZİNİ………………..………………………………...vi ŞEKİLLER DİZİNİ………………………………………………………………………......ix RESİMLER DİZİNİ…………………………………………………………………………..x TABLOLAR DİZİNİ…………………………………………………………….……….....xii ÖZET…………………………………………………………………………...……….….xiii ABSTRACT……………………………………………………………………….…….….xv 1. GİRİŞ……………………………………………………………………………..…….….1 2. GENEL BİLGİLER…………………………………………………………………...…...2 2.1. UVB Işığının Deri Üzerindei Etkileri ve Foto Yaşlanma…………………………….2 2.2. Kök Hücre Nedir?¬¬……………….……………………………………………............6 2.2.1. Kök Hücrelerin Sınıflandırılması……….………………...…………………...7 2.2.1.1.Kök Hücrelerin Farklılaşma Potansiyeline Göre Sınıflandırılması…..7 2.2.1.2 Kök Hücrelerin Köken Aldıkları Dokuya Göre Sınıflandırılması……8 2.3. Embriyonik Kök Hücreler……………………………………………………………10 2.4. Yetişkin Kök Hücreler………………………………………………………………..12 2.4.1. Mezenkimal Kök Hücreler…………………………………………………….13 2.4.1.1. Mezenkimal Kök Hücrelerin in vitro Endotel Hücreler Üzerindeki Etkileri……………………………………………………………………………………….16 2.5. Dermatolojide ve Rejeneratif Tıpta Kök Hücre ve Labaratuvardan Kliniğe Kullanımı……………………………………………………………………………………20 2.6. Kök Hücreleri Proanjiyonik Potansiyeli………………………………....................26 2.7. Mcl 1 Molekülü………………………………………...…………………………….26 2.8. Hücre İçi Sinyal İleti Yolakları………………………………………………………29 2.8.1. Mitojenle Aktifleşen Protein Kinazlar (MAPK’lar)………………………….30 2.8.1.1. ERK 1/2 Yolağı……………………………………………………..32 2.9. Mcl 1 Molekülü ve ERK 1/2 Sinyal Yolağının Hücreler Üzerindeki Etkileri………35 3. GEREÇ VE YÖNTEM…………………………………………………………………...35 3.1. Kullanılan Malzemeler...…………………………………………………….……….35 3.2. Kullanılan Cihazlar…......…………………………..………………………………....36 3.3. Deneyler ………………………………………….…………………………………...37 3.3.1. HaCaT Hücre Hatlarının Temini ve Hücre Ekimi…….....……………………37 3.3.2. İnsan Adipoz Doku Kök Hücre Eldesi………………………………………..38 3.3.3. Hücrelerde Yüzey Antijenlerinin Bakılması……………………..……………44 3.3.4. ELISA Çalışmaları için Ortam Medyumunun Elde Edilmesi…………………43 3.3.5.İnsan Adipoz Doku Kök Hücrelerinden Ortam Medyumu Elde Edilmesi………………………………………………………………………………………46 3.3.6. MTT Deneyi ile Hücre Canlılığının Saptanması……………………………...47 3.3.7. Hücrelerde Apoptoz Saptanması………………………………………………50 3.3.8. Hücrelerde Migrasyonun Saptanması………………………………………….52 3.4. İstatiksel Analizler…………………………………………………………………….52 4. BULGULAR………………………………………………………………………..……..53 4.1.Hücre Canlılığı Sonuçları……………………………………………...........................53 4.1.1. UVB (+) ve ADMSC Ortam Medyumu Uygulanan Grupta Hücre Canlılığı Sonuçları……………………………………………………………………………………..53 4.1.2. UVB (-) ve ADMSC Ortam Medyumu Uygulanan Grupta Hücre Canlılığı Sonuçları……………………………………………………………………………………...56 4.1.3. UVB (-) ve UVB (+) ADMSC Ortam Medyumu Uygulanan Grupta MTT Sonuçları……………………………………………………………………………………...58 4.2. Apoptoz Analizinin Bulguları…………………………………………………………60 4.3. Hücrelerde Migrasyon Analizinin Sonuçları………………………………………….63 4.4. Mcl-1 Sonuçları………………………………………………………………………..64 4.4.1. UVB (+) ve ADMSC Ortam Medyumu Uygulanan Grupta Mcl-1 Sonuçları……………………………………………………………………………………..64 4.4.2. UVB (-) ve ADMSC Ortam Medyumu Uygulanan Grupta Mcl-1 Sonuçları……………………………………………………………………………………..65 4.4.3. UVB (-) ve ADMSC Ortam Medyumu Uygulanan Grupta Mcl-1 Sonuçları……………………………………………………………………………………..66 4.5. ERK 1/2 Sonuçları………………………………………………………………………67 4.5.1. UVB (-) ADMSC ve Ortam Medyumu Uygulanan Grupta ERK 1/2 Sonuçları……………………………………………………………………………………...67 4.5.2. UVB (+) ADMSC ve Ortam Medyumu Uygulanan Grupta ERK 1/2 Sonuçları……………………………………………………………………………………...68 4.5.3. UVB (-) ve UVB (+) ADMSC ve Ortam Medyumu Uygulanan Grupta ERK 1/2 Sonuçları……………………………………………………………………………………...69 5. TARTIŞMA………………………………………………………………………………..69 6. SONUÇLAR VE ÖNERİLER……………………………………………………….…….75 KAYNAKLAR…………………………………………………………………………….....77 ÖZGEÇMİŞ……………………………………………………………………………..…....89	tr_TR
dc.language.iso	tur	tr_TR
dc.publisher	Adnan Menderes Üniversitesi Sağlık Bilimleri Enstitüsü	tr_TR
dc.rights	info:eu-repo/semantics/openAccess	tr_TR
dc.subject	İnsan adipoz doku, mezenkimal kök hücre, epidermal hücre, UVB ışını, onarıcı, canlandırıcı.2	tr_TR
dc.title	UVB IŞIĞINA MARUZ KALAN EPİDERMAL HÜCRELERDE İNSAN ADİPOZ DOKU MEZENKİMAL KÖK HÜCRELERİNİN ONARICI VE CANLANDIRICI ETKİLERİNİN ARAŞTIRILMASI	tr_TR
dc.type	doctoralThesis	tr_TR
dc.contributor.department	Adnan Menderes Üniversitesi Sağlık Bilimleri Enstitüsü Biyokimya-Tıp ABD	tr_TR