Bu çalışmada, destek materyali olarak poli(2-hidroksiletil metakrilat-metakriloil
amidofenilalanin [P(HEMA-MAPA)] nanopartikülleri kullanıldı. MAPA komonomeri,
ligand olarak yapısına girdiği P(HEMA) nanopartiküllerine hidrofobik özellik
kazandırdı ve metakroil klorür ile fenilalaninin uygun koşullarda tepkimeye girmeleri
sonucu elde edildi. P(HEMA) ise temel taşıyıcı katı destek olarak seçildi. 158 nm
boyutundaki P(HEMA-MAPA) nanopartikülleri; HEMA ve MAPA monomerlerinin
emülsiyon polimerizasyonu ile üretildi. Nanopartiküllerin 1874.5 m2/g spesifik yüzey
alanına sahip olduğu bulundu ve elementel analiz ve Fourier Transform Infrared
Spektroskopisi (FTIR), yöntemleri ile karakterize edildi. Sentezlenip karakterize edilen
bu nanopartiküller lipaz immobilizasyonu için kullanıldı. Adsorpsiyon deneyleri, farklı
ortam koşullarında (pH, başlangıç derişimi, sıcaklık gibi) kesikli deney sisteminde
incelendi. Nano-P(HEMA) ve P(HEMA-MAPA) nanoyapılarının lipaz adsorpsiyon
kapasiteleri sırasıyla 1.2 mg/g ve 329.9 mg/g bulundu. Bunlara ek olarak
immobilizasyon şartlarının optimizasyonu çalışmaları da (optum pH, sıcaklık, ısıl
kararlılık, depo kararlılığı gibi) gerçekleştirildi. mmobilize enzimin kinetik
parametreleri (Vmax, Km) tespit edilerek, serbest enziminkiyle karşılaştırıldı.
Adsorpsiyon-desorpsiyon döngüsü 5 kez tekrarlandı ve adsorpsiyon kapasitesinde
önemli bir değişim gözlenmeden lipaz adsorpsiyonunda kullanılabilir olduğu bulundu.
In this study, poly(2-hydroxyethyl methacrylate) P(HEMA) nanoparticles carrying
methacryloylamidophenylalanine (MAPA) ligand, as a comonomer, providing
hydrophobic functionality to the adsorbent were prepared. MAPA was synthesized by
reacting methacryloyl chloride with phenylalanine. We selected P(HEMA) as the basic
solid matrix. Nanospheres with an average size of 158 nm were obtained by emulsion
polymerization of P(HEMA) and MAPA. The nanoparticles had a specific surface area
of 1874.5 m2/g, and were characterized by elemental analysis and Fourier Transform
Infrared Spectroscopy (FTIR). Nanospheres which synthesized and characterized were
used for the lipase immobilization. Adsorption experiments were investigated under
different medium conditions (i.e., medium pH, initial concentration, temperature) in a
batch system. Lipase adsorption capacity of P(HEMA) and P(HEMA-MAPA) beads
II
were 1.2 mg/g and 329.9 mg/g respectively. In addition to these, studies of optimization
of the immobilization conditions were obtained. Kinetic parameters (Vmax, Km) of the
immobilized enzyme are determined and compared to the kinetic parameters that of free
enzyme. It was observed that lipase after 5 adsorption-desorption cycle, P(HEMA-
MAPA) nanoparticles can be used without significant loss in lipase adsorption capacity.
