82
ÖZET
Mastitisli sığırlardan izole edilen shiga toksini üreten Escherichia coli suslarının
virulans faktörlerinin saptanması
Shiga toksini üreten Escherichia coli (STEC) kanlı ishal, hemorajik kolitis ve
hemolitik üremik sendromu gibi ciddi insan hastalıklarına neden olan önemli bir
patojendir. STEC, gelismis ülkelerin oldukça önemli bir sorunudur. STEC suslarının genel
habitatı, özellikle sığır ve koyun gibi ruminantların intestinal sistemleridir. Sığır ve koyun
gibi ruminantların dıskıları ile kontamine gıdalar, insanlarda enfeksiyonların temel
kaynağını olusturmaktadır.
Bu çalısmada, Aydın ilindeki sığırlarda mastitisli sütlerden izole edilen shiga
toksini üreten Escherichia coli (STEC) suslarında intimin (eaeA), stx1 ve stx2 genlerinin
varlığının Polimeraz Zincir Reaksiyonu (PCR) ile belirlenmesi, bu izolatların
serogruplandırılması amaçlanmıstır. Çalısmamızda subklinik mastitisli olarak belirlenen
160 sığırdan 160 süt örneği materyal olarak kullanıldı. Fenotipik identifikasyon ile E. coli
olarak belirlenen 31 izolatın, genotipik olarak intimin (eaeA) ve shiga toksin (stx1 ve stx2)
genlerinin incelenmesi ile 6 izolatın STEC olduğu saptandı. Đzolatlarda intimin (eaeA) ve
shiga toksin (stx1 ve stx2) genlerinin varlığı, PCR ile spesifik primerler kullanılarak
gerçeklestirildi. E. coli izolatları; O26, O55, O86, O111, O114, O119, O125, O126, O127,
O128, O142 ve O158 serogruplarına karsı polivalan (II, III ve IV) sera kullanarak lam
aglütinasyon testi ile tespit edildi. PolivalanII, PolivalanIII ve Polivalan IVseraları ile bu
izolatlara lam aglutinasyon testi uygulandı. Yapılan lam aglütinasyon testi sonucunda
Escherichia coli susunun serogrupları belirlendi. Bu değerlendirmeye göre 31 izolatın 8’ i
polivalan antiserum II, 14’ü polivalan antiserum III ve 9’u ise polivalan antiserum IV
pozitif olarak saptandı. Sığırlarda, intimin (eaeA) pozitif STEC suslarının neden oldukları
infeksiyonların durumunu açıklığa kavusturulabilmesi için, bu konuda daha genis kapsamlı
epidemiyolojik çalısmaların yapılmasına ihtiyaç duyulmaktadır.
Shiga toxin producing Escherichia coli (STEC) is a major pathogen causing severe
diseases in humans, like diarrhoea, haemorrhagic colitis and haemolytic-uraemic
syndrome. The usual habitat of STEC is the intestinal tract of ruminants, especially cattle.
STEC is an important problem in development countries. Foods that become contaminated
with faeces from these animals serve as the primary source of human infection.
The aim of this study is to determine the presence of shiga toxin (stx1 and stx2) and
intimin (eaeA) genes in shiga toxin producing Escherichia coli (STEC) strains that isolated
from bovine milk in Aydın with Polimerase Chain Reaction (PCR) and serotyping of these
isolates. The material of our study were consisted to 160 milk samples taken from 160
subclinic mastitic dairy cows. By phenotypical identification, 31 isolates that were
determined as Escherichia coli were also performed genetically identification. The
presence of shiga toxin (stx1 and stx2) and intimin (eaeA) genes in this isolates was
revealed with multiplex PCR using spesific primers. E. coli isolates were identified to
determine O26, O55, O86, O111, O114, O119, O125, O126, O127, O128, O142 and O158
serotypes by slide agglutination method with polyvalent (II, III and IV) sera. These isolates
was carried out using the slide agglutination method with polyvalent II, polyvalent III and
polyvalent IV sera. E. coli serotypes were determined using the slide agglutination method.
According to this assessment, a total of 8 of 31 isolates were identified as polyvalent II, 14
of 31 isolates were identified as polyvalent III and 9 of 31 isolates were identified as
polyvalent IV. For investigation of the precise status of the infections caused by eaeA
positive STEC strains in dairy cows further epidemiologic studies should be designed.
