Meme Kanseri Patogenezinde Rps26p25 Pseudogeninin Rolünün Araştırılması

Abstract

Amaç: Bu çalışmada, RPS26P25 pseudogeninin meme kanseri hücre hatlarında ekspresyonunun değerlendirilmesi, gen susturulmasının hücre canlılığı, apoptoz ve sisplatin duyarlılığı üzerindeki etkilerinin araştırılması amaçlanmıştır. Gereç ve Yöntem: Analitik tasarımdaki bu araştırma, laboratuvar ortamında in vitro olarak yürütülmüştür. RPS26P25 ekspresyon analizi için MCF‑7, MDA‑MB‑231 ve sağlıklı hücre hattı MCF10A kullanılmıştır. Hücre konsantrasyonu optimizasyonu MTT testi ile gerçekleştirilmiş, her iki meme kanseri hücre hattı için optimal yoğunluk 250×10³ hücre/ml olarak belirlenmiştir. qRT‑PCR ile gen ifadesi ölçülmüş, gen susturulması için siRNA uygulanmıştır. Sitotoksisite ve IC₅₀ değerleri MTT testiyle hesaplanmış, sisplatin uygulamasından sonra apoptoz ve hücre döngüsü analizleri akım sitometrisi ile yapılmıştır. Deneyler üç tekrarlı olarak gerçekleştirilmiş, istatistiksel değerlendirmelerde Student T-testi ve One-way ANOVA uygulanmıştır. Bulgular: RPS26P25 geninin ekspresyonu MCF‑7’de MCF10A’ya göre 14,95 kat, MDA‑MB‑231'de 5,74 kat artış göstermiştir. Gen susturulması, her iki tümör hücre hattında hücre canlılığını azaltmış ve apoptozu artırmıştır. Sisplatine karşı bulunan IC₅₀ değerleri MCF‑7 için 2,46 µM, MDA‑MB‑231 için 49,56 µM olarak hesaplanmıştır. Ek olarak, gen susturulması sisplatin etkisiyle kombine edildiğinde, her iki hücre hattında erken ve geç apoptoz oranlarında artış belirlenmiştir. Sonuç: RPS26P25 pseudogeninin meme kanseri hücrelerinde artmış şekilde ifade edildiği ve gen susturulmasının hücre canlılığını azaltıp apoptozu artırarak sisplatine duyarlılığı yükselttiği bulunmuştur. Bu sonuçlar, RPS26P25’in hedeflenmesinin potansiyel bir terapötik strateji olabileceğini düşündürmektedir.