Clostridium Septicum Aşılarında Potensin Vero Hücrelerinde Toksin Nötralizasyon Testi ile Belirlenmesi

Abstract

Amaç: Clostridial aşıların kontrolünde 4R prensipleri ile örtüşmeyen toksin nötralizasyon testi yerine Vero hücrelerde nötralizasyon analizinin uygulanması amaçlanmıştır. Gereç ve Yöntem: Çalışmada Bornova Veteriner Kontrol Enstitüsü, Veteriner Biyolojik Ürünler Kontrol Laboratuvarına rutin “satış izni” için gelen farklı üreticilere ait 20 adet C.septicum alfa toksoid içeren aşı ve 10 adet bu komponentten yoksun (Clostridial ya da clostridial olmayan) aşı kullanılmıştır. Her bir aşı için daha önce hastalık ve aşılama geçmişi olmayan New Zealand White ırkı 10 adet tavşan immunizasyona alınmış ve serumları toplanmıştır. Serumlar eşit şekilde bölünerek Vero hücre hatlarında ve her serum için 15 adet farede TNT uygulaması yapılmıştır. Her iki testin sonuçları karşılaştırılarak yeni yöntemin TNT’ ye göre spesifite ve sensivitesi hesaplanmıştır. Bulgular: TNT’ si yapılan 20 adet septicum içerikli aşının 16 tanesi “limit geçer” , 4 tanesi ise “limit altında” bulunmuştur. Septicum içermeyen 10 adet aşının tavşan serumlarında ise septicum toksine karşı antitoksin oluşmadığı için TNT’ de tüm fareler ölmüştür. Vero hücre hattı testinde de aynı aşıların TNT ile paralel sonuçları alınmıştır. Buna göre yeni yöntemin TNT’ ye göre Sensitivite = 16/ (16+0) x 100 = % 100 ve Spesifite = 14/ (14+0) x 100 = % 100 olarak aralarındaki kuvvetli ilişki ve validite görülmüştür. Sonuç: Vero hücre nötralizasyon analizinde TNT ile benzer sonuçlar alınarak daha az zaman, maliyet ve daha stabil sonuçlar alındığı tespit edilmiştir.