Sunitinib uygulamasının caki-1 renal kanser hücreleri üzerindeki anti- anjiyogenik ve apoptotik etkilerinin değerlendirilmesi

Abstract

Amaç: Bu araştırmanın amacı, sunitinibinin berrak böbrek hücreli karsinom hücreleri olan Caki- 1 hücrelerinin farklı dozlarında anti- anjiyogenik etkilerini araştırmak, hücrelerde olan canlılığına etkilerini görmek ve migrasyona etkilerini saptamaktır. Gereç ve Yöntem: Sunitinib ilacının hücre canlılığına olan etkisi 3- (4, 5- dimetiltiyazol- 2- il) 2,5- difenil tetrazolyum bromür (MTT) ile belirlenmiş olup farklı dozları (0. 5 µM, 1 µM, 2. 5 µM, 5 µM, 10 µM) 24, 48 ve 72 saatlik maruziyet sürelerinde temas ettirilmiştir. Caki-1 hücrelerinde ELISA yöntemi ile VEGF konsantrasyonları saptanmıştır. Migrasyon deneyi ile anjiyogenik etkileri değerlendirilmiştir. Low sitometri ile apoptozun doza bağlı artışı saptanmıştır. Hoechst PI boyaması yapılarak hücre canlılıkları incelenmiştir. Bulgular: Sunitinibin (p<0,05) artan konsantrasyonlarda oluşturduğu sitotoksisitenin doza bağlı olarak anlamlı bir şekilde arttğı tespit edildi. Sunitinib 24, 48 ve 72. saatte 2,5 μM (p<0,001) konsantrasyonda kontrol grubuna göre canlılığı %70’ in altına düştüğü görüldü. Migrasyon deneyinde, hücre kapanma aralığı 24. saatte kontrolde %40,4 iken 2,5 μM konsantrasyonda %2,5 olarak kaydedilmiştir. Muse Cell Analyzer Caspase- 3/ 7 ile yapılan analizde apoptozun konsantrasyon miktarı arttıkça arttığı gözlemlenmiştir. Sonuç: Sunitinibin artan dozuna bağlı olarak Caki- 1 hücre canlılığının azaldığı görülmüştür. Ayrıca, sunitinibin Caki- 1 hücrelerindeki apoptozu arttırdığı gözlemlenmiştir.

Objective: The aim of this study was to investigate the anti-angiogenic effects of sunitinib at different doses of Caki-1 cells, which are clear renal cell carcinoma cells, to see its effects on cell viability and to determine its effects on migration. Materials and Methods: The effect of sunitinib on cell viability was determined with 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl) 2,5-diphenyl tetrazolium bromide (MTT) and different doses (0.5 µM, 1 µM, 2.5 µM, 5 µM, 10 µM) were contacted at exposure times of 24, 48 and 72 hours. VEGF concentrations were determined in Caki-1 cells by ELISA method. Angiogenic effects were evaluated by migration assay. A dose-dependent increase in apoptosis was detected by low cytometry. Cell viability was examined by Hoechst PI staining. Results: It was determined that the cytotoxicity of sunitinib (p<0.05) at increasing concentrations increased significantly depending on the dose. It was observed that the viability of sunitinib decreased below 70% compared to the control group at a concentration of 2.5 μM (p<0.001) at 24, 48 and 72 hours. In the migration experiment, the cell closure interval was recorded as 40.4% in the control at 24 hours and 2.5% at 2.5 μM concentration. In the analysis performed with Muse Cell Analyzer Caspase-3/ 7, it was observed that apoptosis increased with increasing concentration. Conclusion: It was observed that Caki-1 cell viability decreased with increasing dose of sunitinib. In addition, sunitinib was observed to increase apoptosis in Caki-1 cells.