1. Earsiv@Adu
  2. Tez
  3. Doktora
Please use this identifier to cite or link to this item: http://hdl.handle.net/11607/3788
Full metadata record
DC FieldValueLanguage
dc.contributor.advisorEREN, Ülker-
dc.contributor.authorTATAR, Musa-
dc.date.accessioned2020-07-09T11:41:02Z-
dc.date.available2020-07-09T11:41:02Z-
dc.date.issued2020-07-09-
dc.date.submitted2019-12-26-
dc.identifier.urihttp://hdl.handle.net/11607/3788-
dc.description.abstractSunulan çalışmada, hücrenin endoplazmik retikulum (ER) stresinden korunması veya ER stresinin ya da olumsuz etkilerinin ortadan kaldırılmasına yardımcı olunması amaçlanmıştır. Bu amaç doğrultusunda tunikamisin (TM) ile testiste oluşturulacak olan ER stresinin olumsuz etkilerine karşı, melatoninin önleyici veya tedavi edici yönde kullanımının olası sonuçlarının araştırılması planlanmıştır. Çalışmada, 42 adet erişkin Sprague Dawley rat, yedi eşit gruba ayrıldı. TM1 grubuna tek doz TM, 200 µg/kg dozda i.p. olarak uygulandı. Uygulamadan 24 saat sonra doku örnekleri alındı. TM2 grubundan, tek doz TM uygulamasını takip eden yedi gün sonra doku örnekleri alındı. Proflaktik melatonin (PMel) grubuna yedi gün boyunca, 20 mg/kg melatonin i.p. olarak uygulandıktan sonra, tek doz TM uygulanıp 24 saat sonra doku örnekleri alındı. Tedavi melatonin (TMel) grubuna ise tek doz TM uygulandıktan 24 saat sonra başlayarak, yedi gün boyunca melatonin uygulandı ve 24 saat sonra doku örnekleri alındı. Sham kontrol gruplarına (SK1 ve SK2) hem TM çözücüsü hem de melatonin çözücüsü, deneme gruplarının protokolü doğrultusunda verildi. Kontrol grubuna herhangi bir uygulama yapılmadı. Elde edilen doku örnekleri histolojik, immunohistokimyasal, enzim histokimyasal, moleküler biyolojik ve biyokimyasal yöntemlerle incelendi. Araştırma ile TM’nin testis dokusuna toksik etkisi, hem uygulamadan 24 saat sonra hem de bir hafta sonra alınan dokularda, histolojik ve biyokimyasal yöntemlerle belirlendi. TM’nin hücrede ER stresi oluşturduğu, GPR78 üretim yoğunluğunun immunohistokimyasal ve moleküler düzeyde belirlenmesiyle tespit edildi. ER stresinin dokuda oksidan düzeyi ve apoptozis oranını artırdığı gösterildi. Melatoninin, TM kullanımından önce veya sonra yedişer gün süreyle kullanımının etkileri, histolojik ve biyokimyasal yöntemlerle belirlendi. Dokularda kontrol grubuna benzer görüntüler elde edildiği ve antioksidan oranının arttığı görüldü. Histometrik olarak hem TM hem de melatoninin tubulus çapını küçülttüğü belirlendi. Bununla birlikte profilaktik olarak melatonin uygulamasının, tedavi edici olarak melatonin kullanımından daha başarılı şekilde GRP78 oranını azalttığı, immunohistokimyasal ve moleküler düzeyde belirlendi. Sonuç olarak; melatoninin, hücre hasarı oluşmadan önce uygulanmasının, hücrenin ER stresinden korunmasında etkili olacağı ileri sürülebilir.tr_TR
dc.description.tableofcontentsİÇİNDEKİLER KABUL VE ONAY SAYFASI i TEŞEKKÜR ii İÇİNDEKİLER iii SİMGELER VE KISALTMALAR DİZİNİ vii ŞEKİLLER DİZİNİ ix RESİMLER DİZİNİ x TABLOLAR DİZİNİ xii ÖZET xiii SUMMARY xv 1. GİRİŞ 1 2. GENEL BİLGİLER 4 2.1. Erkek Genital Sistem 4 2.1.1. Testisin Yapısı (Anatomisi) 4 2.1.2. Testisin Histolojisi 5 2.1.2.1. Tubulus seminiferus kontortus 7 2.1.2.2. Sertoli hücresi 8 2.1.2.3. Spermatogenezis 10 2.1.3. İntersitisyel Doku 13 2.1.4. Leydig Hücreleri 14 2.1.4.1. Testosteron 15 2.1.5. Spermatozoonun Yapısı 15 2.1.5.1. Baş 15 2.1.5.2. Boyun 16 2.1.5.3. Kuyruk 16 2.1.6. Eşey Hücrelerini İleten Yollar 16 2.1.6.1. Tubulus seminiferus rektus 16 2.1.6.2. Rete testis 17 2.1.6.3. Epididimis 17 2.1.6.4. Duktus deferens 17 2.1.7. Testisin Embriyolojisi ve Gelişimi 18 2.1.7.1. Erkek cinsiyetinin belirlenmesi 20 2.1.8. İlk Spermatogenik Dalga 22 2.1.9. Spermatogenik Siklus 22 2.1.10. Spermatogenik Siklus Dönemleri 24 2.1.11. Testis Dokusunda Apoptoz 27 2.1.12. Spermatogenik Hücrelerde Bulunan Hsp70 Proteinleri 28 2.1.13. Erkek Hipotalamik-Hipofiz-Gonadal Eksen 29 2.2. Endoplazmik Retikulum 29 2.2.1. ER’de Proteinlerin Biyosentezi, İşlenmesi ve Olgunlaşması 30 2.2.2. ER’nin Moleküler Şaperonları 32 2.2.2.1. GRP78 (BIP) 32 2.2.3. N-bağlı Glikolizasyon 34 2.2.4. Protein Katlanması 35 2.2.5. Endoplazmik Retikulum’da Kalite Kontrolü 36 2.3. Endoplazmik Retikulum Stresi 37 2.3.1. Yanlış Katlanmış Proteinlerin Tanınması 37 2.3.1.1. BIP aracılığıyla yanlış katlanmış proteinlerin tanınması 38 2.3.1.2. UGGT aracılığıyla yanlış katlanmış proteinin tanınması 38 2.3.2. ER Stresi Nasıl Algılanır? 38 2.3.3. Katlanmamış Protein Yanıtı (UPR) 39 2.3.4. Katlanmamış Protein Cevabı Sinyal Yolları 40 2.3.4.1. Protein kinaz RNA (PKR) - benzeri ER kinaz (PERK) 41 2.3.4.2. İnositol gerektiren protein – 1 (inositol requiring enzyme 1 / IRE1) 42 2.3.4.3. Aktive edici transkripsiyon faktörü – 6 (ATF6) 43 2.3.5. ER Stresinde Hatalı Katlanan Proteinlerin Yıkımlanması (ERAD) 43 2.3.6. ER Stresi ile Uyarılmış Apoptoz 45 2.3.6.1. CHOP 45 2.3.6.2. JNK 45 2.3.6.3. Kaspaz 12 46 2.3.7. ER Stresi İndükleyici Kimyasallar 46 2.3.7.1. Tunikamisin 47 2.3.8. ER Stresi ve ROS 48 2.3.9. Melatonin 49 2.3.9.1. ER stresi ve melatonin 51 2.3.9.2. Erkek genital sistem üzerine melatonin etkileri 51 3. GEREÇ VE YÖNTEM 54 3.1. Gereç 54 3.2. Yöntem 55 3.2.1. Testis Ağırlıklarının Ölçümü ve Testis Ağırlık İndeksi (TAİ) Hesaplama 55 3.2.2. Histolojik Yöntem 56 3.2.2.1. Üçlü boyama metodunun uygulanması 56 3.2.2.2. Histolojik değişimlerin belirlenmesi 57 3.2.2.3. Histometrik değişimlerin belirlenmesi 57 3.2.3. İmmunohistokimyasal Yöntem (Strept ABC Boyama Yöntemi) 57 3.2.3.1. GRP78 yoğunluğunun değerlendirilmesi 58 3.2.4. Western Blot (İmmunoblotlama) Metodu 59 3.2.4.1. Elektroforezis ve transfer işleminde kullanılan çözeltiler ve hazırlanışları 59 3.2.4.2. SDS-PAGE jelinin hazırlanması ve elektroforezis işlemi 60 3.2.4.3. Ayrıştırılan proteinlerin membrana transferi 61 3.2.4.4. Antikor ile inkübasyon 61 3.2.4.5. Görüntüleme ve analiz 62 3.2.5. Biyokimyasal Yöntem 62 3.2.5.1. Testis dokusunda oksidan (MDA) ve antioksidan (SOD) seviyelerinin belirlenmesi 62 3.2.6. Enzim Histokimyasal Yöntem (TUNEL Metodu) 64 3.2.6.1. Apoptozis yoğunluğunun değerlendirilmesi 65 3.2.7. İstatistiksel Değerlendirme 66 4. BULGULAR 67 4.1. Vücut Ağırlığı ve Testis Ağırlığı Bulguları 67 4.1.1. Vücut Ağırlığı Analizi 67 4.1.2. Testis Ağırlık Analizi 67 4.1.2.1. Testis ağırlık indeksi (TAİ) bulguları 68 4.2. Histolojik Bulgular 68 4.2.1. Histometrik Değişimler 72 4.3. İmmunohistokimyasal Bulgular 76 4.3.1. GRP78 Yoğunluğunun Değerlendirilmesi 77 4.4. Moleküler Biyolojik Bulgular 78 4.4.1. Western-Blot (Immunoblotlama) Sonuçları 78 4.5. Biyokimyasal Bulgular 80 4.5.1. Testis Dokusunda Antioksidan (SOD) ve Oksidan (MDA) Parametre Analizlerine ait Bulgular 80 4.6. Enzim Histokimyasal Bulgular 81 4.6.1. Apoptozis Yoğunluğunun Değerlendirilmesi 83 5. TARTIŞMA 86 5.1. Vücut Ağırlığı ve Testis Ağırlığı 86 5.2. Histolojik Değişimler 87 5.2.1. Seminifer Tubul Çapı ve Epitel Yüksekliği 88 5.2.2. XIV. Dönem Tubulus Oranı 89 5.3. GRP78 Yoğunluğu 89 5.4. Testis Dokusunda MDA ve SOD Düzeyleri 91 5.5. Apoptozis Yoğunluğu 92 6. SONUÇ VE ÖNERİLER 93 KAYNAKLAR 94 Ek 1 (MAKÜ HADYEK Kararı) 123 ÖZGEÇMİŞ 125tr_TR
dc.language.isoturtr_TR
dc.rightsinfo:eu-repo/semantics/embargoedAccesstr_TR
dc.subjectApoptoz, Endoplazmik retikulum stresi, Melatonin, Testis, Tunikamisintr_TR
dc.titleRAT TESTİSİNDE TUNİKAMİSİN İLE OLUŞTURULAN ENDOPLAZMİK RETİKULUM STRESİNE KARŞI MELATONİN KULLANIMININ ETKİSİtr_TR
dc.typedoctoralThesistr_TR
dc.contributor.authorID17741tr_TR
Appears in Collections:Doktora

Files in This Item:
File Description SizeFormat 
musa tez 06.01.2020 pdf.docx8.41 MBMicrosoft Word XMLView/Open
Show simple item record


Items in DSpace are protected by copyright, with all rights reserved, unless otherwise indicated.