Please use this identifier to cite or link to this item:
http://hdl.handle.net/11607/3404
Full metadata record
DC Field | Value | Language |
---|---|---|
dc.contributor.advisor | KIRKAN, Prof. Dr. Şükrü | - |
dc.contributor.author | DENİZ, DEHA ALİ | - |
dc.date.accessioned | 2018-09-21T07:17:51Z | - |
dc.date.available | 2018-09-21T07:17:51Z | - |
dc.date.issued | 2018-09-21 | - |
dc.date.submitted | 2018-09-11 | - |
dc.identifier.uri | http://hdl.handle.net/11607/3404 | - |
dc.description.abstract | Günümüzde Clostridium chauvoei içeren veteriner bakterin aşılarının potens testleri; aşı ile immunize edilmiş kobaylara patojen C. chauvoei suşunun verilerek kontrol edilmesi prensibine dayanmaktadır. C. chauvoei epruvasyon testinde, in vivo test prensibine dayanması, çok fazla miktarda deney hayvanı kullanıma ihtiyaç duyulması, hayvanların bireysel duyarlılık, direnç ya da kondisyonlarına göre sonuçların değişkenlik göstermesi, tekrar edilebilmesinin güçlüğü, test süresinin uzunluğu, test sonuçlarının değerlendirilmesinin hayvanlardaki letalite ya da spesifik semptomlara dayalı olması ve hayvan refahı yönünden uygun bulunmaması nedeniyle in vitro alternatif testler önem kazanmaya başlamıştır. Araştırmamızda, C. chauvoei içeren aşıların potens testlerinde kullanılmakta olan epruvasyon testine alternatif olarak bir ELISA prosedürünün uygulanabilirliğinin araştırılması hedeflenmiştir. Araştırma materyalini 15 adet C. chauvoei komponenti içeren ve olası yalancı reaksiyonların tespiti için 5 adet bu komponenti içermeyen farklı marka ve serilerde 20 adet aşı oluşturmaktadır. Araştırmamızda, Yanıkara aşılarının kontrolünde standart metot olan kobay epruvasyon testinde, tüm C. chauvoei içeren aşıların geçme kriterlerini karşıladığı, bu komponentin bulunmadığı aşıların ise herhangi bir koruyucu vasıf sergilemediği gözlenmiştir. C. chauvoei bulunan aşılarda koruyucu yanıt %90 ile %100 arasında (4 adet aşıda %90, 11 adet aşıda %100 koruma) seyretmiştir. Araştırmamızda ELISA yöntemi olarak, indirekt double sandviç ELISA prosedürü kullanılmıştır. C. chauvoei komponenti içeren ve epruvasyon testi ile geçer sonuç veren 15 adet aşının 14’ünde relatif potens sonuçlarının kabul kriterine göre dağılımında RP≥1 bulunmuştur. Kabul limitini karşılayan pozitif aşılarda relatif potens değerleri 1,020 ile 5,438 arasında seyretmiştir. Araştırmamızda kullanılan ELISA prosedürünün sensitivitesi %93,33, spesifitesi %100 ve relatif doğruluk oranı ise %95 olarak bulunmuştur. Araştırmamızda elde edilen sonuçlar doğrultusunda, ELISA metodu ile epruvasyon prosedürleri arasında mukayese edilebilir doğruluk ve kesinlikte sonuçlar alındığı, iki metodun iyi bir korelasyon gösterdiği ve in vitro metot dönüşümünün önemli avantajlara sahip olduğu görülmektedir. | tr_TR |
dc.description.tableofcontents | KABUL VE ONAY SAYFASI i TEŞEKKÜR ii İÇİNDEKİLER iii SİMGELER VE KISALTMALAR DİZİNİ vi ŞEKİLLER DİZİNİ viii RESİMLER DİZİNİ ix TABLOLAR DİZİNİ x ÖZET xi ABSTRACT xii 1. GİRİŞ 1 2. GENEL BİLGİLER 7 2.1. Clostridium chauvoei ve Yanıkara 7 2.2. Epidemiyoloji 9 2.3. Clostridium chauvoei’nin Patogenezi 10 2.4. Clostridium chauvoei’nin Antijenik Karakterizasyonu 11 2.4.1. Flagella 11 2.4.2. Toksinler 11 2.4.2.1. Hemolizin 11 2.4.2.2. Beta Toksin 11 2.4.2.3. Gamma Toksin (Hiyalüronidazlar) 12 2.4.2.4. Nöromidaz 12 2.4.3. Hücre Duvarı 12 2.5. Tanı 13 2.6. Tedavi 13 2.7. Koruma 13 3. GEREÇ VE YÖNTEM 16 3.1. Gereç 16 3.1.1. Kullanılan Deney Hayvanları 16 3.1.2. Kullanılan Kimyasallar 16 3.1.2.1. Kaplama Solüsyonu 16 3.1.2.2. Tuzlu Fosfat Buffer Solüsyonu (PBS) 16 3.1.2.3. Bloklama Solüsyonu 17 3.1.2.4. Yıkama Solüsyonu 17 3.1.2.5. Stop Solüsyonu 17 3.1.2.6. Kalsiyum Klorit Solüsyonu (%7,5) 17 3.1.2.7. Diğer Kimyasallar 18 3.1.3. Monoklonal, Poliklonal Antikorlar ve Konjugat 18 3.1.3.1. Clostridium chauvoei Flagella-Spesifik Monoklonal Antikor (MAb) 18 3.1.3.2. Clostridium chauvoei Flagella-Spesifik Tavşan Poliklonal Antikor 18 3.1.3.3. Goat Anti-Rabbit IgG (H+L) (Konjugat) 18 3.1.4. Clostridium chauvoei Spor Süspansiyonu 18 3.1.5. Kullanılan Cihazlar 19 3.2. Yöntem 19 3.2.1. İş akışı ve Koordinasyon 19 3.2.2. Aşıların Hazırlanması ve Temini 19 3.2.3. Kobaylarda Clostridium chauvoei Epruvasyon testi 21 3.2.3.1. Clostridium chauvoei Epruvasyon Testi Prosedürleri 21 3.2.4. Enzim Bağlı İmmunosorbent Analizi (ELISA) 22 3.2.4.1. Bakterinlerin ELISA Testi İçin Hazırlanması ve Antijen Elüsyon İşlemi 22 3.2.4.1.1. Alüminyum adjuvantlı bakterinler için 23 3.2.4.1.1.1. Sodyum sitratla yıkama 23 3.2.4.1.1.2. Fosfat buffer ile yıkama 23 3.2.4.1.2. Yağlı adjuvantlı bakterinler için 23 3.2.4.2. ELISA Testinin Yapılışı 23 3.2.5. Referans Aşının Oluşturulması 26 3.2.6. Test Sonuçlarının İstatistiki Hesaplanması ve Yorumlanması 26 4. BULGULAR 27 4.1. Kobay Epruvasyon Testi Bulguları 27 4.2. ELISA Bulguları 29 4.3. Pre-validasyon Verileri 34 4.3.1. Sensivite (Duyarlılık) 34 4.3.2. Spesifite (Özgüllük) 34 4.3.3. Relatif Doğruluk (Efektiflik) 34 4.3.4. Tekrarlanabilirlik 35 4.3.5. Tekrar Üretilebilirlik 35 5. TARTIŞMA 37 6. SONUÇ VE ÖNERİLER 47 7. KAYNAKLAR 48 8. ÖZGEÇMİŞ 55 | tr_TR |
dc.language.iso | tur | tr_TR |
dc.rights | info:eu-repo/semantics/openAccess | tr_TR |
dc.subject | Clostridium chauvoei, Veteriner aşı, Epruvasyon, ELISA, Relatif Potens | tr_TR |
dc.title | CLOSTRIDIUM CHAUVOEI AŞILARININ POTENSİNİN BELİRLENMESİNDE ELISA PROSEDÜRÜNÜN KULLANILMASININ ARAŞTIRILMASI | tr_TR |
dc.type | doctoralThesis | tr_TR |
dc.contributor.department | AYDIN ADNAN MENDERES ÜNİVERSİTESİ SAĞLIK BİLİMLERİ ENSTİTÜSÜ | tr_TR |
Appears in Collections: | Doktora |
Files in This Item:
There are no files associated with this item.
Items in DSpace are protected by copyright, with all rights reserved, unless otherwise indicated.